血清纯化步骤
1,纯化填料选择:
抗原亲和纯化,使用对应的多肽制备抗原亲和填料,用于纯化。
ProteinA/G纯化,使用成品ProteinA/G填料(常规有ProteinA填料,ProteinG填料,ProteinA/G填料,通常用第三种)。
2,纯化方法:
亲和层析纯化,血清多次流过亲和层析柱,多遍收集抗体。
3,抗体检测:
①elisa检测抗体效价。
②跑胶检测抗体纯度及相对定量(采用与标准品条带比较的方法相对定量)
这种定量方法其实还会更准确一点,由于纯度的关系,其中的杂蛋白会使BCA或者OD280测的浓度有虚高。根据需要用BCA或者OD280定量。