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流式细胞术关键术语
2023-12-10 20:30:01

流式细胞术是一种用于分析单个细胞的技术,其中涉及到一些关键的术语:

 

荧光标记(Fluorescent labeling): 细胞表面或内部的特定蛋白质或分子使用荧光染料标记,以便在流式细胞仪中检测和分析这些标记物。
常见的荧光染料:

  • FITC(Fluorescein isothiocyanate): 发出绿色荧光的染料,常用于标记细胞表面的蛋白质或抗体。
  • PE(Phycoerythrin): 发出橙红色荧光的染料,适合用于多参数流式分析。
  • PerCP(Peridinin chlorophyll protein complex): 发出橙色荧光的染料,常用于细胞表面标记。
  • APC(Allophycocyanin): 发出红色荧光的染料,也适合多参数流式分析。
  • Alexa Fluor染料系列: 这是一系列荧光染料,有不同的激发和发射波长,提供更多选择以适应多参数分析需求。
  • Pacific Blue/Pacific Orange: 这些染料具有蓝色或橙色的荧光,适用于多通道流式细胞分析。
  • BV(Brilliant Violet)染料系列: 这是一组发出蓝紫色荧光的染料,可用于多参数分析。
  • Cy系列染料(Cy3,Cy5,Cy7等): 这些染料具有不同的荧光波长,可用于多色标记。

每种染料都有其特定的激发和发射波长,因此在多参数流式分析中选择染料时要考虑到它们的光谱特性,以确保它们在流式细胞仪中能够被准确检测和区分。

流式细胞仪(Flow cytometer): 用于将标记的细胞按照其荧光特性逐个检测和分析的设备。
 

单细胞分析(Single-cell analysis): 对单个细胞进行分析,包括细胞表面标记物、大小、形状、细胞周期等方面的研究。
 

免疫荧光染色(Immunofluorescence staining): 使用荧光标记的抗体来识别特定蛋白质或抗原,以便在流式细胞术中检测它们。
 

细胞计数(Cell counting): 流式细胞术能够对样本中的细胞数量进行准确计数。
     流式细胞计数可以针对整个样本或者特定的细胞亚群进行。利用流式细胞仪的精确检测和计数功能,可以得出样本中不同类型细胞的数量,同时也能评估细胞的大小、形状和其他特征。这对于许多研究、临床诊断和药物开发等领域都具有重要意义。

 

散射信号(Scatter signals): 流式细胞仪通过细胞的散射特性来区分不同类型的细胞,包括前向散射(FSC)和侧向散射(SSC)。
    前向散射光 (forward scatter):FSC信号方向与激光束平行,主要反映被测细胞的体积大小和活力,细胞体积越大,其FSC值就越大;
    侧向散射光(side scatter): SSC方向与激光束和液流形成的平面相垂直,其信号强度反映细胞内部颗粒度和精细结构的变化。细胞越不规则,细胞表面的突起越多,细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物质越多,其SSC值就越大

 

数据分析(Data analysis): 对从流式细胞仪中获得的数据进行处理和解读,通常包括对细胞亚群的鉴定、细胞计数和荧光信号的定量分析等。
在流式细胞术领域,有一些常见的软件用于流式数据的分析和可视化。其中包括:

  • FlowJo: 这是用于流式数据分析和可视化的流式细胞术专用软件,提供丰富的分析工具和图表,用于探索和解释细胞群体数据。
  • FCS Express: 另一个流式细胞数据分析软件,具有用户友好的界面和多种分析功能,支持从简单的细胞计数到高级的多参数分析。
  • FlowCytometryTools: 这是Python语言的一个流式细胞数据分析库,提供各种分析和可视化工具,适合对流式数据进行自定义分析。
  • Cytobank: 一个基于云的流式细胞数据分析平台,提供数据存储、共享和多参数分析功能,可用于大规模的数据处理和团队合作。
  • FlowSOM: 用于高维流式数据分析的工具,采用自组织地图(Self-Organizing Maps)进行细胞群体的聚类和可视化。
  • Scaffold: 这个软件不仅适用于流式细胞术,还支持多种生物信息学数据的分析,提供交互式可视化和数据挖掘功能。
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