流式细胞术是一种用于分析单个细胞的技术,其中涉及到一些关键的术语:
荧光标记(Fluorescent labeling): 细胞表面或内部的特定蛋白质或分子使用荧光染料标记,以便在流式细胞仪中检测和分析这些标记物。
常见的荧光染料:
每种染料都有其特定的激发和发射波长,因此在多参数流式分析中选择染料时要考虑到它们的光谱特性,以确保它们在流式细胞仪中能够被准确检测和区分。
流式细胞仪(Flow cytometer): 用于将标记的细胞按照其荧光特性逐个检测和分析的设备。
单细胞分析(Single-cell analysis): 对单个细胞进行分析,包括细胞表面标记物、大小、形状、细胞周期等方面的研究。
免疫荧光染色(Immunofluorescence staining): 使用荧光标记的抗体来识别特定蛋白质或抗原,以便在流式细胞术中检测它们。
细胞计数(Cell counting): 流式细胞术能够对样本中的细胞数量进行准确计数。
流式细胞计数可以针对整个样本或者特定的细胞亚群进行。利用流式细胞仪的精确检测和计数功能,可以得出样本中不同类型细胞的数量,同时也能评估细胞的大小、形状和其他特征。这对于许多研究、临床诊断和药物开发等领域都具有重要意义。
散射信号(Scatter signals): 流式细胞仪通过细胞的散射特性来区分不同类型的细胞,包括前向散射(FSC)和侧向散射(SSC)。
前向散射光 (forward scatter):FSC信号方向与激光束平行,主要反映被测细胞的体积大小和活力,细胞体积越大,其FSC值就越大;
侧向散射光(side scatter): SSC方向与激光束和液流形成的平面相垂直,其信号强度反映细胞内部颗粒度和精细结构的变化。细胞越不规则,细胞表面的突起越多,细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物质越多,其SSC值就越大
数据分析(Data analysis): 对从流式细胞仪中获得的数据进行处理和解读,通常包括对细胞亚群的鉴定、细胞计数和荧光信号的定量分析等。
在流式细胞术领域,有一些常见的软件用于流式数据的分析和可视化。其中包括: