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谈起细胞因子检测，目前市面上的检测试剂盒种类繁多。从单一因子到多个因子的检测，再从简单的HRP催化底物显色到电化学发光……琳琅满目，目不暇接，不过始终万变不离其宗，抗原抗体反应，甚至于就是双抗夹心的原理，只是变了个形式，所有的检测方式，不管是Elisa，还是多因子检测，始终逃不过“基质效应”这个怪物。

可能科研的同学们很少知道这个词的，不过对于在生物制药公司focus生物分析的老师，肯定是非常熟悉了。科研的研究范围相对比较窄，检测使用的试剂盒都已商业化，而公司里的检测因子对象就没有专门的试剂盒，需要自己开发一套方法，那怎么判定这个方法可靠呢？那就要提到下面的文件，生物分析的M10文件，主要是对检测方法的一套评价标准，我们常见的Elisa等因子检测的评价标准也在其中，称之为配体结合分析。

言归正传，所谓“基质效应”，其实就是看样本的复杂程度，样本中的杂物质会影响到目标蛋白的检测准确性，也就是说，原本可能是30pg/ml的浓度，最终被杂物质影响了，只有10pg/ml。举个简单的例子，同一份血样，它的血清（没有抗凝剂）和血浆（有抗凝剂）最终检测的结果肯定是不一样，因为成分不同。

所以为了解决这个基质效应，也为了检测的准确性，我们在样本的前处理方面，需要注意的细节很多。现阶段，大家的研究样本类型从最初的血清血浆，慢慢地往唾液、粪便、细胞系等方向发展。近些年由于肿瘤研究的兴起，对于组织的研究也开始热起来，目前的样本类型非常繁杂。不过不怕，按照我们的指南进行处理，肯定没问题。

本篇为大家带来的是外周全血样本的处理。

血浆处理

处理方式：将全血采集至含EDTA抗凝剂（大部分细胞因子检测采用此种抗凝管）的采血管中，上下轻轻颠倒混匀。30min中内，4℃下3000g离心20min，收集上清。

保存条件：-80℃

运输条件：干冰

血清处理

处理方式：将全血采集至不含抗凝剂（可以促凝或者空管）的采血管中，室温放置30min或4℃放置2h。4℃下3000g离心20min，收集上清。

冻存条件：-80℃

运输条件：干冰

注意事项

• 建议分装后-80℃冻存，避免反复冻融。
• 检测代谢标志物时，需要根据试剂盒说明书添加酶抑制剂，在放入-80℃保存。酶抑制剂建议采用Sigma：DPP4-M（DPP-IV 酶抑制剂，终浓度0.1mM）或蛋白酶抑制剂即可。

在处理外周全血样本时遵循这些注意事项，处理得当，就会获得准确可靠的实验结果。

下一篇，我们将会分享细胞、组织裂解液的样本处理。