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2024-05-19 22:02:19 正确的样本处理可以确保细胞和组织中的蛋白质和其他生物分子被充分释放，适当的裂解方法也可以最大限度地减少样本在处理过程中的损失，增加样本中目标分子的可及性，从而提高检测的灵敏度。
本篇为大家带来的是细胞、组织裂解液的处理。
细胞裂解液
处理方式：收集细胞后加入PBS，400g离心5min，弃去上清，加入适量裂解液（ 10^7细胞对应加入200ul 裂解液），4℃放置 20min，4℃下13000g离心 10min，取上清。
保存条件：-80℃
运输条件：干冰
组织裂解液
处理方式：收集组织后，将组织冻存于-80条件下等待处理，组织称重后转移至带有钢珠的EP管中，加入适量裂解液（20mg组织加入200ul 裂解液），通过组织破碎器充分破碎，4℃放置 20min，4℃下13000g离心 10min，取上清。
保存条件：-80℃
运输条件：干冰
注意事项
一、细胞或组织裂解液在进行因子检测之前，需通过BCA蛋白定量将蛋白调整至同一水平。
二、组织裂解液中不能含有SDS、NP40等离子去垢剂成分，需加入酶抑制剂防止蛋白降解。
三、贴壁细胞需用PBS清洗后进行裂解处理，150mm dish加0.6ml，100mm dish加0.3ml，24孔板每孔加入0.1ml，106-107次方细胞加100-200ul裂解液。
其余注意事项可参考浅谈因子检测前样本处理之外周全血
2023-11-26 19:00:19 
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